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腺相关病毒包装

       腺相关病毒(AAV)是一个常见的人细小病毒,自然缺陷、无包被和无致病原性。AAV复制周期由两个明显的阶段构成:潜伏期和增殖期。在缺少辅助病毒诸如腺病毒、疱疹病毒、牛痘病毒或者在基因毒条件下,AAV能复制产生子代病毒颗粒。在缺少辅助病毒的情况下,腺相关病毒整合其基因组到19号染色体的一个特别位点并保持整合直到随后的辅助病毒将其从潜伏状态下拯救出来。AAV的位点特异性的整合能力、其自然缺陷以及其无致病原性使其成为基因治疗载体成为可能。AAV基因组是一个线性、单链(ssDNA)分子,4680个核苷酸,在每个末端含有一个145个碱基末端重复序列(TR)。TR序列折叠成发卡结构作为DNA复制起始和包装重组AAV基因组为感染性的病毒颗粒所需的唯一已知顺式作用元件。

AAV有以下特点:

1. 安全性最高。相比慢病毒(Lentivirus)和腺病毒(Adenovirus),腺相关病毒有突出的安全优势:极低基因组整合概率;极低免疫原性;实验操作安全性为最安全的一级(外源基因不涉及原癌基因、有毒基因的载体)。
2. 长效转导。过去20年中rAAV作为高效及长期表达基因的载体在基础研究及临床基因治疗领域广泛使用。至今录有的最长的灵长类肌肉内表达时间有10年以上。
3. 多样的组织倾向性。通过修饰、突变AAV的外壳蛋白序列产生新的组织倾向性的AAV血清型,目前文献中已经存在数千的突变型血清,具有极广的可选择性。